Ibridazione in situ a fluorescenza
L'ibridazione in situ fluorescente (FISH) è una delle numerose tecniche utilizzate per cercare il DNA delle tue cellule, cercando la presenza o l'assenza di specifici geni o porzioni di geni.
Molti diversi tipi di cancro sono associati a anomalie genetiche note. E per genetica, non stiamo parlando solo di ereditarietà. Nel corso della vita, le cellule possono commettere errori quando si dividono e crescono.
Le mutazioni nel DNA associate al cancro possono accumularsi in queste cellule.
Come funziona FISH?
FISH è una tecnica che utilizza sonde fluorescenti per rilevare geni specifici o parti di geni (sequenze di DNA). Il personale di laboratorio del centro medico e gli oncologi usano FISH per aiutare a valutare i pazienti che potrebbero avere il cancro ea volte per monitorare un paziente a cui è già stato diagnosticato un cancro e trattato.
FISH può essere fatto utilizzando vari tipi di campioni in base alla posizione e al tipo di cancro sospettato: cellule tumorali ottenute da sangue periferico, da una biopsia del midollo osseo o da una biopsia del linfonodo e tessuto fissato in formalina fissato in formalina (questo si riferisce a un campione di tessuto che viene elaborato in laboratorio e incorporato in un tipo di cera, rendendolo più rigido, in modo che possa essere tagliato in sezioni sottili e montato per la visualizzazione al microscopio).
Cosa significano le lettere?
La "H" in FISH si riferisce all'ibridazione.
Nell'ibridizzazione molecolare, una sequenza marcata di DNA o RNA viene utilizzata come sonda - visualizza un mattoncino Lego rosso, se vuoi. La sonda viene utilizzata per trovare un mattone Lego equivalente, o sequenza di DNA, in un campione biologico.
Il DNA nel tuo campione è come pile di mattoncini Lego, e la maggior parte dei mattoni in queste pile non corrisponde alla nostra sonda rossa.
E tutti i tuoi mattoncini sono organizzati ordinatamente in 23 paia di pile di mattoni: ogni pila è uno dei cromosomi omologhi accoppiati, più o meno. A differenza dei mattoncini Lego, la nostra sonda Lego rossa è come un potente magnete e trova la sua corrispondenza senza dover passare attraverso le pile.
La "F" si riferisce alla fluorescenza. La nostra sonda rossa potrebbe perdersi tra le pile di mattoni, quindi è etichettata con una tinta fluorescente colorata in modo che si illumini. Quando trova la corrispondenza tra le 23 pile accoppiate, un'etichetta fluorescente rivela la sua posizione. Quindi, ora puoi vedere come ricercatori e clinici potrebbero usare FISH per aiutare a identificare dove (quale pila, o quale cromosoma) si trova un particolare gene per un dato individuo.
"I" e "S" stanno per in situ . Questo si riferisce al fatto che il nostro mattoncino rosso Lego sta cercando la sua corrispondenza all'interno del campione che hai dato .
Che dire dei tumori del sangue specifici?
FISH e altre procedure di ibridazione in situ sono utilizzate per diagnosticare una varietà di anomalie cromosomiche: cambiamenti nel materiale genetico, cambiamenti nei cromosomi, inclusi i seguenti:
Eliminazione - parte di un cromosoma è sparita
Traslocazione - parte di un cromosoma si stacca e si attacca su un altro cromosoma
Inversione - parte di un cromosoma si interrompe e si reinserisce nuovamente, ma in ordine inverso
Duplicazione - parte di un cromosoma è presente in troppe copie all'interno della cellula
Ogni tipo di cancro può avere una propria serie di cambiamenti cromosomici e sonde rilevanti. FISH non solo aiuta a identificare i cambiamenti genetici iniziali in un processo patologico come il cancro, ma può anche essere usato per monitorare la risposta alla terapia e alla remissione della malattia.
I cambiamenti genetici rilevati da FISH a volte offrono ulteriori informazioni su come il cancro di un individuo è probabile che si comporti, sulla base di ciò che è stato osservato in passato in persone con lo stesso tipo di cancro e cambiamenti genetici simili. Talvolta il FISH viene utilizzato dopo che la diagnosi è già stata fatta, per raccogliere ulteriori informazioni che potrebbero aiutare a prevedere l'esito di un paziente o il miglior trattamento.
I pesci possono identificare anomalie cromosomiche nelle leucemie , inclusa la leucemia linfatica cronica (LLC). Per la leucemia linfocitica cronica / il linfoma linfocitico piccolo, FISH consente ai pazienti di scoprire la loro categoria prognostica: buona, media o scarsa. Nella leucemia linfoblastica acuta (ALL), la genetica delle cellule leucemiche può indicare il livello di rischio di cancro e aiutare a guidare le decisioni terapeutiche.
I pannelli FISH sono disponibili anche per linfoma, mieloma multiplo, disordini proliferativi delle plasmacellule e sindrome mielodisplastica. Nel caso del linfoma a cellule del mantello, ad esempio, vi è una traslocazione che il FISH può rilevare chiamato GH / CCND1 t (11; 14) che è frequentemente associato a questo linfoma.
Perché il pesce?
Un vantaggio di FISH è che non deve essere eseguito su celle che si dividono attivamente. I test citogenetici di solito richiedono circa tre settimane, perché le cellule tumorali devono crescere in laboratorio per circa 2 settimane prima di poter essere testate. Al contrario, i risultati FISH sono solitamente disponibili dal laboratorio entro pochi giorni.
> Fonti:
> Codici CPT per il test citogenetico del cancro.
> Ibridazione in situ a fluorescenza (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Ibridazione in situ a fluorescenza (FISH). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg A, Cooley LD, et al. Guida per test di ibridazione in situ di fluorescenza in disturbi ematologici. The Journal of Molecular Diagnostics: JMD. 2007; 9 (2): 134-143.